Testes mpox mais rápidos através do CRISPR

Mpox é uma doença viral rara que se espalha através do contato físico entre pessoas. Atualmente, o teste de mpox requer equipamento de laboratório e pode levar algumas horas para obter os resultados do teste. Mas novas pesquisas sugerem uma forma de testes mais rápidos que poderão ser feitos em qualquer clínica em breve.

Ahasan Ahamed, um estudante de pós-graduação orientado por Weihua Guan na Universidade Estadual da Pensilvânia, apresenta esta pesquisa na 68ª Reunião Anual da Sociedade Biofísica, realizada de 10 a 14 de fevereiro de 2024 na Filadélfia, Pensilvânia.

Embora os sintomas da mpox sejam geralmente leves, com febre, erupção cutânea e gânglios linfáticos inchados, casos graves podem ocorrer e requerem atenção médica. Como a doença é contagiosa, os testes são importantes para que as pessoas com a doença possam isolar-se até que os sintomas desapareçam ou obtenham cuidados médicos adequados.

Para desenvolver um teste mais rápido, os pesquisadores usaram CRISPR, a tecnologia de edição genética ganhadora do prêmio Nobel. Desde 2017, os cientistas expandiram a aplicação da tecnologia CRISPR, desde a edição de genes até técnicas de diagnóstico molecular.

Para este estudo, Ahamed criou uma sequência genética combinada com um repórter para atingir especificamente o vírus mpox. Em seguida, um RNA CRISPR programável se liga ao alvo e a uma proteína chamada Cas12a e, juntos, o CRISPR/Cas12a cliva o repórter para criar vários tamanhos de fragmentos. Os pesquisadores podem então usar a tecnologia de detecção de nanoporos para analisar os fragmentos desses repórteres, fornecendo um teste rápido e preciso que detecta se o mpox está ou não presente na amostra.

A equipe confirmou que o teste que criaram é específico para mpox – quando testaram amostras do vírus da varíola bovina, um parente próximo do mpox, o teste não apresentou resultado positivo.

Todo o processo é rápido: “No total, leva de 32 a 55 minutos para detectar o alvo, dependendo da carga viral”, disse Ahamed, o que é muito mais rápido do que atualmente leva para testar o mpox em um laboratório usando o método PCR.

Os pesquisadores planejam aplicar esta tecnologia de nanoporos para criar testes para outros patógenos, permitindo que uma amostra seja testada para vários alvos usando um dispositivo portátil. E embora a tecnologia não esteja atualmente disponível comercialmente, Ahamed tem esperança de que em breve criarão um dispositivo que poderá tornar este tipo de teste de patógenos amplamente disponível.