Teste detecta coinfecção por novas espécies de parasitas em casos graves de leishmaniose visceral

Nos últimos anos, médicos e cientistas em partes do Brasil onde a leishmaniose visceral (LV) é endêmica têm visto números crescentes de casos de co-infecção por Leishmania infantum e Crithidia, também um protozoário, mas até agora considerado um mosquito parasita que não pode infectar humanos. ou outros mamíferos. O diagnóstico preciso é dificultado pela falta de testes específicos simples.

Para acelerar e facilitar a detecção dos patógenos envolvidos, apoiando decisões adequadas quanto ao tratamento, pesquisadores da Universidade Federal de São Carlos (UFSCar) desenvolveram um teste PCR que analisa o material genético da amostra e produz resultado em menos de duas horas. Um artigo sobre o estudo foi publicado na revista Medicina Tropical e Doenças Infecciosas.

A leishmaniose é uma doença negligenciada e considerada um problema de saúde pública global. O Brasil notifica mais de 3.500 casos por ano, segundo o Ministério da Saúde, ou 93% de todos os casos na América Latina. A doença causou 165 mortes no Brasil em 2020.

A LV é a forma mais grave da doença, afetando baço, fígado, medula óssea e gânglios linfáticos, podendo ser letal se não for tratada corretamente ou se for mal diagnosticada. O principal agente da LV é L. infantum.

O novo método é um avanço em relação à técnica diagnóstica usual. No estudo, foi altamente preciso na identificação e quantificação de L. infantum e Crithidia em amostras obtidas in vitro ou coletadas de hospedeiros humanos, bem como de cães, gatos e insetos, por meio de biópsias de pele ou aspiração de medula óssea.

“Embora existam outros métodos moleculares para identificação de espécies, eles exigem o sequenciamento do DNA da amostra, que é trabalhoso, lento e caro. Nosso teste analisa o material genético do parasita diretamente de vetores e tecido humano ou animal”, disse Sandra Regina Costa Maruyama, último autor do artigo e professor de genética evolutiva e biologia molecular da UFSCar.

Ao contrário dos testes rápidos utilizados pelas clínicas de saúde e farmácias, que não detectam directamente os agentes patogénicos, mas identificam os anticorpos relevantes, os investigadores conceberam o seu ensaio PCR quantitativo baseado em corantes com base em sequências alvo de L. infantum e Crithidia em amostras experimentais e clínicas. . Um teste teve que ser realizado primeiro para detectar o primeiro parasita, seguido de outro para identificar o último.

“Os alvos resultaram da nossa análise dos genomas das duas espécies. Nosso estudo mais recente mostrou especificidade em diferentes tipos de amostras. O teste agora pode ser otimizado para mostrar em uma única reação se a infecção foi causada por L. infantum, Crithidia ou ambos “, disse Maruyama.

O teste pode ser realizado por qualquer laboratório de diagnóstico capaz de realizar testes qPCR (agora mais difundidos após a pandemia de COVID-19). Também pode ser utilizado em pesquisas epidemiológicas, monitoramento de carga parasitária e acompanhamento de tratamento.

Casos de coinfecção

O estudo envolveu a análise de 62 parasitas isolados de tecidos de pacientes com LV, com 51 testes positivos para Crithidia. Além disso, a coinfecção da medula óssea por Crithidia e L. infantum foi identificada em dois novos casos de LV no Brasil. Em maio, o grupo publicou um artigo sobre um caso de LV grave em que ambas as espécies foram detectadas.

Segundo Maruyama, além da eficácia do teste, os resultados mostram que a infecção por Crithidia é mais frequente do que se supunha até agora e que a coinfecção pelos dois protozoários parece ocorrer sobretudo nos casos mais graves.

“Ainda não entendemos as implicações clínicas da presença de Crithidia nos casos de LV, mas suspeitamos que a coinfecção agrava a doença ou impede que os pacientes respondam ao tratamento recomendado para L. infantum”, disse ela. “Identificar corretamente as espécies de parasitas garante que medidas apropriadas possam ser tomadas rapidamente para prevenir a progressão do quadro clínico do paciente, reduzindo potencialmente a mortalidade. Também aponta para o possível desenvolvimento de medicamentos e tratamentos mais específicos no futuro”.